論文分享｜基于MGC系列揭示環(huán)境鎂離子對副溶血性弧菌毒力與生物膜形成的全局調(diào)控

發(fā)布時(shí)間：2025-01-17　來源：新芝生物　瀏覽量：0

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研究摘要

　　副溶血性弧菌是一種廣泛存在于海洋生態(tài)系統(tǒng)中的細(xì)菌，常引起人類急性胃腸炎。鎂離子作為海水中第二豐富的金屬陽離子，對副溶血性弧菌的生長和基因表達(dá)至關(guān)重要。盡管如此，關(guān)于鎂離子如何具體影響副溶血性弧菌生理特性的詳細(xì)機(jī)制仍不明確。通過RNA測序分析，研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)共有1494個(gè)基因受到鎂離子的顯著調(diào)控。其中與側(cè)鞭毛、胞外多糖、Ⅲ型分泌系統(tǒng)2、VI型分泌系統(tǒng)(T6SS)1、T6SS2和耐熱直接溶血素相關(guān)的基因大部分被下調(diào)。此外，18個(gè)可能參與c-di-GMP代謝的基因和八十多個(gè)編碼假定調(diào)節(jié)因子的基因也存在顯著差異表達(dá)。這些結(jié)果表明，副溶血性弧菌對鎂離子脅迫的適應(yīng)過程可能受到復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的嚴(yán)格調(diào)控。鎂離子促進(jìn)了副溶血弧菌的增殖速度、游泳運(yùn)動(dòng)能力和細(xì)胞黏附能力，但抑制了其群集運(yùn)動(dòng)能力、生物膜形成能力和c-di-GMP生成能力，而對莢膜多糖生成能力和對HeLa細(xì)胞的細(xì)胞毒性沒有顯著影響。這些發(fā)現(xiàn)揭示了鎂離子對副溶血弧菌生理特性和基因表達(dá)的綜合影響。

MGC系列微生物生長曲線分析儀的應(yīng)用

　　為了評估不同濃度鎂離子對副溶血性弧菌生長的影響，研究團(tuán)隊(duì)使用了MGC-200微生物生長曲線分析儀。實(shí)驗(yàn)中，副溶血性弧菌RIMD2210633菌株在含有不同濃度MgCl2(0、3.5、35和55 mM)的心臟浸出液(HI)培養(yǎng)基中培養(yǎng)。將培養(yǎng)的OD600達(dá)到1.4的副溶血性弧菌以1：1000的稀釋倍數(shù)接種到含有不同MgCl2濃度的HI培養(yǎng)基中，然后分裝到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔含有200μL菌懸液，每個(gè)濃度設(shè)置12個(gè)生物學(xué)重復(fù)。MGC-200每20分鐘自動(dòng)檢測一次OD600值，以監(jiān)測細(xì)菌的生長情況。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

　　如圖所示，隨著鎂離子濃度的增加，副溶血性弧菌的增殖速度顯著加快，且生長適應(yīng)期縮短，這表明鎂離子可以促進(jìn)副溶血性弧菌的增殖速度。

結(jié)論

　　MGC系列微生物生長曲線分析儀具有氣體環(huán)境監(jiān)控、高通量培養(yǎng)、全自動(dòng)檢測以及實(shí)時(shí)顯示生長曲線等的功能，整個(gè)過程無需人工頻繁取樣，也無需人員值守，大大降低了污染風(fēng)險(xiǎn)，真正實(shí)現(xiàn)了人力的解放和研究效率的提升，將成為您科研路上的得力助手。